Resumo

A epilepsia do lobo temporal é caracterizada pela ocorrência de crises recorrentes e espontâneas, resultantes de descargas anormais e desordenadas de neurônios. Sabe-se que no modelo de epilepsia do lobo temporal induzido por pilocarpina ocorre aumento da geração de espécies reativas de oxigênio (EROs), bem como a morte de neurônios hipocampais. O objetivo deste estudo foi o de investigar a participação de EROs na morte neuronal durante o período agudo da epilepsia induzida por pilocarpina e o efeito da apocinina, um antioxidante inibidor da NADPH oxidase, sobre a neurodegeneração. Ratos Wistar adultos (n=5/grupo) foram submetidos à injeção de pilocarpina para a indução do status epilepticus (SE) e sacrificados após diferentes períodos (3, 6, 12 e 24 horas do início do SE). Foi avaliada a morte neuronal nas regiões CA1 e CA3 e no giro denteado do hipocampo (GD) pelo método de Fluoro-Jade B e a geração de EROs por fluorescência da dihidroetidina (DHE). O tratamento com apocinina (3 mg por dia) foi realizado durante os 7 dias prévios à injeção de pilocarpina. Foi realizada análise quantitativa pela contagem do número de células positivas para Fluoro-Jade e medidas da intensidade da fluorescência da DHE. Para análise estatística utilizou-se ANOVA, adotando-se nível de significância de 5%. Os valores foram expressos em média do valor absoluto ± desvio padrão. No GD, observou-se morte neuronal em todos os períodos avaliados, ou seja, 3 (124±26), 6 (136±70), 12 (207±23) e 24 horas (456±54) após indução de SE, assim como aumento da geração de EROs nestes mesmos períodos, 3 (11%), 6 (16%), 12 (13%) e 24 horas (15%). Na região CA1, foi observado aumento significativo de morte neuronal após 24 horas (378±180) e aumento da geração de EROs após 6 (16%) e 24 horas (15%). Em CA3 foi observada morte neuronal após 24 horas (203±129) e aumento da geração de EROs também após 24 horas (20%). O tratamento com apocinina foi realizado no grupo 24h após indução de SE, já que este apresentou morte neuronal mais intensa. A apocinina provocou diminuição significativa nos níveis de EROs na região CA1 (17%), CA3 (20%) e GD (24%), além de diminuição da morte neuronal em CA1 (77%), CA3 (57%) e GD (48%). Nossos resultados indicam que o estresse oxidativo contribui para a morte neuronal durante o status epilepticus induzido por pilocarpina. Além disso, pode-se sugerir que a NADPH oxidase está envolvida nesse processo, uma vez que o tratamento com apocinina diminui a neurodegeneração presente neste modelo de epilepsia.