SBNeC 2010
Resumo:C.088


Poster (Painel)
C.088Localização das GTPases Rho em compartimentos sub-celulares de fotorreceptores em retina humana
Autores:Marcio Roberto Octavio Gonçalves (USP - Universidade de São PauloISCMSP - Santa Casa de São Paulo) ; Adamo Lui Netto (ISCMSP - Santa Casa de São Paulo) ; Luiz Alves Pereira Pereira (CTX - Central de Notificação, Captação e Distribuição de Órgãos –) ; Reginaldo Carlos Boni Boni (ISCMSP - Santa Casa de São PauloCTX - Central de Notificação, Captação e Distribuição de Órgãos –) ; Marinilce Fagundes Santos (USP - Universidade de São Paulo) ; Dania Emi Hamassaki (USP - Universidade de São Paulo)

Resumo

Objetivos: Os fotorreceptores são neurônios altamente especializados na detecção de luz. Esses neurônios exibem polaridade, onde algumas moléculas importantes na fototransdução do sinal luminoso são encontradas entre os segmentos interno e externo. Estudos anteriores do laboratório têm mostrado a presença de GTPases Rho em fotorreceptores da retina de aves e mamíferos. Os principais membros dessa família (RhoA, Rac1 e Cdc42) são conhecidos por regular a dinâmica do citoesqueleto e participar de vários processos, tais como apoptose, proliferação e diferenciação, entre outros. Esse trabalho teve como objetivo investigar a localização das GTPases RhoA, Rac1 e Cdc42 nos compartimentos sub-celulares de fotorreceptores na retina humana por meio de imunofluorescência. Métodos: Humanos de ambos os sexos, acima de 18 anos que evoluíram a óbito nos hospitais da Santa Casa de São Paulo e doaram tecido ocular para transplante terapêutico e pesquisas tiveram seus olhos enucleados e posteriormente a retina dissecada (Comitê de ética e pesquisa da Santa Casa, projeto no. 028/09). As retinas foram processadas para o método de imunofluorescência para localização de RhoA, Rac1 e Cdc42 (1:20-1000, Santa Cruz) e visualizadas com microscópio confocal (Nikon). Resultados: RhoA, Rac1 e Cdc42 foram observadas na retina de humanos, especialmente em fotorreceptores. Uma fraca marcação foi observada em bastonetes. Por outro lado, os cones apresentaram uma marcação mais forte para todos os anticorpos, mais especificamente nos segmentos, no citoplasma e na terminação sináptica. RhoA mostrou uma marcação mais intensa nos segmentos externos e internos, no corpo celular e nos prolongamentos em direção à camada plexiforme externa. Cdc42 evidenciou uma marcação principalmente no segmento interno, no corpo celular e na camada plexiforme externa, enquanto Rac1 apresentou apenas um acentuado padrão de marcação predominantemente no segmento externo dos cones. Conclusão: As GTPases RhoA, Rac1 e Cdc42 estão presentes em fotorreceptores da retina de humanos, com uma distribuição diferente daquela já descrita para roedores e aves. A localização diferenciada dessas proteínas sugere que elas possam ter papéis distintos na manutenção do citoesqueleto e/ou estar envolvidas no processo de fototransdução, principalmente Rac1 e Cdc42 por estarem presentes no segmento externo dos fotorreceptores.


Palavras-chave:  retina humana, fotorreceptor, GTPases