Resumo

Objetivos: Sabe-se que a alterações nutricionais em perídos críticos da vida como gestação e/ou lactação podem predispor o indivíduo ao desenvolvimento de doenças na vida adulta, sendo uma forma de programação metabólica. Demostramos que a desnutrição materna na lactação programa para sobrepeso e resistência central à leptina na vida adulta. Mais recentemente, observamos em um modelo de desnutrição causada pelo desmame precoce, que os ratos adultos exibem maior adiposidade, hiperfagia, hiperleptinemia e alterações na via da leptina, caracterizada por uma redução da expressão hipotalâmica de JAK-2 e pSTAT-3 causada pelo aumento de SOCS-3. Assim, no presente estudo avaliamos a expressão do Neuropeptídeo Y, que possui efeito orexigênico, em diferentes núcleos hipotalâmicos envolvidos no controle alimentar nos animais adultos programados pelo desmame precoce. Metodologia e Resultados: O desenho experimental foi aprovado pelo comitê de ética da UERJ (CEA/017/2009). Ratas Wistar lactantes de 3 meses foram separadas em: DP (desmame precoce) – mães envolvidas com fita adesiva para interromper a amamentação nos 3 últimos dias da lactação e C (controle) – mães cujos filhotes tiveram livre acesso ao leite materno por toda lactação, sendo realizado o desmame padrão aos 21 dias de vida. Aos 180 dias de idade, os animais foram submetidos à perfusão intracardíaca com salina, seguida de paraformaldeído 4% e paraformaldeído 4% com sacarose 10%. Realizamos cortes coronais de congelação (20µm) e imunohistoquímica, utilizando o anticorpo anti-NPY (Sigma, 1:1000), revelado com ALEXA FLUOR 488 (Molecular Probes, 1:400). O número de amostras para imunohistoquímica foi de 4 animais de diferentes ninhadas por grupo. Também analisamos o conteúdo de NPY em hipotálamo total por Western blot, detectado por quimioluminescência (ECL). Os resultados com imunohistoquímica demonstraram que expressão de NPY estava mais intensa e havia mais fibras marcadas nos animais DP, em comparação aos controles, em todas as áreas do hipotálamo: núcleo arqueado, área periventricular, núcleo paraventricular, hipotálamo lateral, núcleos ventromedial e dorsomedial. Este achado foi corroborado pelo conteúdo de NPY hipotalâmico medido pelo Western blot, que foi 68% maior no grupo DP (DP: 9,596 ± 0,384, n=5 vs C: 5,686 ± 1,128, n=6). Conclusões: O aumento da expressão de NPY nos animais adultos precocemente desmamados pode justificar a hiperfagia destes. Os resultados do presente estudo em conjunto com os nossos dados anteriores evidenciam alterações nas vias envolvidas no controle do comportamento alimentar, com aumento da via orexigênica e redução da via anorexigênica induzidas pelo desmame precoce. Este modelo experimental reforça a idéia que a desnutrição neonatal, mesmo que por um curto período da lactação é importante para a programação de futuros distúrbios endocrino-metabólicos.