Resumo

Resumo: Objetivo: Um recente estudo de nosso laboratório mostrou que o estriado dorsal está relacionado com com o condicionamento de medo ao som (Neuroscience. 84-94, 2008). No entanto, quando os animais são treinados no condicionamento de medo ao som, o componente contextual também pode estar envolvido no processo de aprendizagem; portanto o hipocampo pode estar envolvido nesses procedimento. Para se excluir qualquer interferência do contexto na expressão dos IEGs no estriado, o hipocampo dorsal foi inativado com um antagonista do receptor de NMDA – D-2-Amino-5-phosphonopentanoic acid; AP-5. O presente estudo teve como objetivo avaliar a expressão de três genes de expressão imediata (IEGs) – c-fos, egr-1 e arc- na resposta ao treino do condicionamento de medo ao som. Métodos: Ratos Wistar (3 meses de idade) foram submetidos a cirurgia estereotáxica para implatação de cânulas-guia no hipocampo dorsal (AP:-3,5 mm; ML: ±2,5mm; DV: -3,2mm, em relação ao bregma). Todas as tarefas comportamentais foram realizados após um período de recuperação de 10 dias. No dia do treino, os ratos foram divididos em 3 grupos: controle de injeção; não pareado (exposição ao contexto e ao som, nenhum choque foi aplicado); pareado (5 pareamentos de som e choque; 0,8mA; intervalo entre os pareamentos de 30s). Cada grupo foi injetado com AP-5 (2,5 μg/μl) ou salina. Trinta minutos após o treino, os animais foram eutanasiados e o hipocampo e o estriado foram dissecados para análise de análise de expressão por PCR quantitativo. Resumidamente, o RNA total foi isolado por homogeneização dos tecidos pelo reagente de Trizol e então tratados com DNAse I. Após quantificação da quantidade de RNA, foram gerados cDNA dessas amostras. A análise quantitativa foi realizada para primers específicos para os genes c-fos, egr-1 e arc. Médias dos valores de CT (cycle threshold) foram determinadas e usadas para comparação de amostras de acordo com o método de 2-ΔΔCT, utilizando como controle interno a β-actina. Os resultados foram analisados por ANOVA fatorial. Resultados: A ANOVA mostrou que o efeito da drogas não alterou a expressão de c-fos (F(1, 20)= 0,28172, p>0,05), egr-1 (F(1,21)= 0,65126, p>0,05) ou arc (F(1, 22)=0,00275, p>0,05). Em relação ao tipo de treino, também não houve diferença para c-fos (F(2,20)=1,0726, p>0,05), egr-1 (F(2,21)= 0,93458, p>0,05) e arc (F(2, 22)=2,0912, p>0,05); assim como a interação treino e droga (c-fos (F(2, 20)=0,05722, p>0,05); egr-1 (F(2, 21)=0,05656, p>0,05) e arc (F(2, 22)=0,04328, p>0,05). Discussão: Esses resultados preliminares sugerem que esses genes de expressão imediata não estão relacionados com a aquisição do condicionamento de medo no estriado 30 minutos após o treino.