Resumo

IL-6 aumenta a sobrevida de células ganglionares da retina: envolvimento dos receptores de adenosina A1. 1.Vicente, Rafael Perígolo, 2.Pereira, Mariana Rodrigues, 4. de Carvalho, Roberto Paes, 5. Araújo, E.G. Departamento de Neurobiologia, Instituto de Biologia, UFF, Niterói, RJ. O objetivo deste trabalho foi avaliar o envolvimento dos receptores de adenosina do tipo A1 no efeito trófico mediado pela IL-6 em células ganglionares da retina in vitro. Ratos da linhagem Lister Hooded foram sacrificados e suas retinas dissecadas em solução salina. Para analisarmos a sobrevida das células ganglionares da retina (CGR) fizemos culturas mista em monocamada e as CGR foram identificadas pela presença do traçador HRP em seus citoplasmas. Para analisarmos a expressão de proteínas e ou ativação delas utilizamos a técnica de Western blot. Nossos resultados mostram que o efeito da IL-6 50ng/mL na sobrevivência das CGR foi abolido pelo tratamento com DPCPX 10nM (CT 4h: 100% CT 48h: 48,49±2,89% IL-6: 99,42±4,98% DPCPX: 49,99±4,00% IL-6/DPCPX 40,42±1,38%n=5-9) enquanto o tratamento com CHA apresentou aumento na sobrevida das CGR (CT 4h: 100% CT 48h: 92,5±3,2% CHA 1nM: 92,5±3,2 CHA 10nM: 80,88±1,95 CHA 100nM:61,16±4,43 n=6-8)Também observamos que o tratamento de retinas de animais P2 com IL-6 e com SQ22536 2μM, aboliu o efeito trófico da IL-6 (CT 4h: 100% CT 48h: 55,32±3,15% IL-6: 96,78±2,53% SQ22536: 57,84±3,6% IL-6/SQ22536: 63,67±4,0% n=5-10), e que este efeito era independente da PKA (CT 4h: 100% CT 48h: 50,61±0,58% IL-6: 96,22±1,4% H89 1µM 50nM : 56,24±4,16% IL-6/H89 98,32±0,71% n=4-7). O tratamento de nossas culturas com K252a bloqueou o efeito da IL-6 (CT 4h: 100% CT 48h: 62,31±2,1% IL-6: 96,64±1,53% K252a 50nM : 65,21±3,5% IL-6/K252a 63,67±4,0% n=5). Ao analizarmos a expressão de BDNF em células tratadas com IL-6 observamos uma diminuição na expressão da neurotrofina em relação ao controle (BDNF: CT: 100% IL-6: 66,73±7,29 n=3) e que quando submetidas ao tratamento com CHA 1nM a expressão tende a seguir o mesmo padrão (BDNF: CT: 100% CHA: 69,75±10,8% n=4) . O Bloqueio da neurotrofina BDNF com anticorpos antiBDNF em culturas tratadas com CHA bloqueou o efeito trófico sobre as CGR (CT 4h: 100% CT 48h: 50,1±1,53% CHA 1nM: 102,5±4,6% AntiBDNF 0,125µg/mL: 56,45±3,29% CHA/AntiBDNF 47,93±1,47%n=5-8) Nossos dados nos permitem concluir que os receptores de adenosina do tipo A1 estão envolvidos no efeito trófico mediado pela IL-6. E que o efeito da IL-6 é dependente da ativação de receptores Trk, sendo a neurotrofina BDNF envolvida neste efeito. Também podemos sugerir que a IL-6 está induzindo a liberação de BDNF em cultura devido ao bloqueio da sobrevida da CGR com anticorpos em cultura. Apoio financeiro: CAPES, CNPQ, FAPERJ e PRONEX.